本期我们来聊聊洗脱珠。友康生物注意到,大部分厂家的病毒采样管并没有添加洗脱珠,也没有认识到洗脱珠的重要性。众所周知,样本采集后的采样管,需涡旋振荡使样本充分从拭子中释放至采样液。
友康生物认为,仅靠振荡并不能有效提升样本释放率,所以坚持在采样液中添加特殊处理的洗脱珠,振荡产生的涡旋驱动洗脱珠撞击采样拭子,使黏附在拭子上的病毒颗粒完全释放至采样液。
那么采样液中的洗脱珠是否真正能够有效促进样本释放,降低“假阴性”,友康生物用以下实验论证——
实验材料:
病毒采样管:去除洗脱珠的友康MT0501-7-3灭活型采样管为实验组;包含洗脱珠的友康MT0501-7-3灭活型采样管为对照组。每组设置两个重复。
拭子:友康7cm折断点植绒拭子。
检测病毒:高浓度PEDV病毒;低浓度PEDV病毒。
核酸提取试剂盒:友康免裂解核酸提取试剂(磁珠法)。
其它材料:友康病毒分离无血清培养基用于稀释病毒液;痰液混合液用于模拟黏性样本。
实验步骤:
病毒液的准备。取病毒原液,采用友康病毒分离无血清培养基进行倍比稀释后得到高浓度病毒液;再对之稀释10倍,得到低浓度的病毒液。两种浓度的病毒液均准备1mL。收集痰液1mL,与病毒液混合,混合后高浓度组病毒为3×104copies/mL,低浓度组病毒为6×103copies/mL。
采样管的准备。采样管分为有洗脱珠和无洗脱珠2种,均配套用7cm折点拭子。
模拟采样过程。取病毒与痰液的混合液100uL于1.5mL离心管中,用拭子将之完全吸取,然后将拭子折断至采样管中,然后盖紧管盖。假设病毒在采样液中充分释放,则高浓度组病毒为1×103copies/mL,低浓度组病毒为2×102copies/mL。
核酸提取与检测。提取核酸之前,先将各组管子在涡旋振荡器上振荡1分钟。采用友康生物免裂解核酸提取试剂(磁珠法)进行核酸的提取。提取完成后对各组进行RT-qPCR检测。
实验结果:
实验解读:
1.去除了洗脱珠后,会导致相同提取条件下核酸的得率更低。 2.在临界的病毒浓度下,采样管中无洗脱珠可能会导致检测结果呈现假阴性。
当前疫情形势依旧不容乐观,“德尔塔”没走,“拉姆达”又来,新冠病毒狡猾多变,逐渐进化出更高的传染性和隐蔽性。对于检测工作的要求与标准更需提高,选用一款稳定好用的病毒采样管至关重要。
作为专注病毒样本处理领域十五年的友康生物,我们用三期实验证明了一款“正确的”病毒采样管应具备的特点。后续我们会持续做实验验证工作,不断探索病毒采样上的“雷点”,并坚持研发这样专业且独具“工匠精神”的病毒采样产品,保障我国核酸检测工作的平稳推进。
友康生物与全国人民站在一起,携手抗疫,共克时艰!我们终将成功!