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尿液分析仪的检测测量中,酶的测定比较复杂,要求条件较高,测试比较困难。一般全自动尿液分析仪只要酶的测定准确,重复性好,其他项目的测定一般没有问题。现就尿液分析仪酶分析中常见的测试不准确、重复性差等原因来进行分析,为使用者和维修工程师参考。
  尿液分析仪酶的测定一般用动力学法进行测试,其原理是在酶反应的最适条件下,用物理、化学或酶促反应的分析方法,在反应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化,以单位时间酶反应初速度计算出酶活力的大小和代谢物的浓度。
  酶的测试结果与以下几点有关:
  (1)340nm为波长低端,能量较低,同时340nm滤光片使用较多,易老化。所以,波长漂移不准,半宽度变化都会影响测量的准确度和重复性。
  (2)动态法测试有延迟时间、测试时间要求。延迟时间在动态法中为预反应时间,测试时间在动态法中为测试的总时间。零级动力学法是针对特定时间段而言的,酶反应刚启动时反应比较复杂,杂反应较多,必须经过一段延迟时间才能进入稳定反应期,各试剂商对这两段时间有严格规定。所以动态法测试一般温度在37℃,延迟时间不少于15s为好。
  (3)对于参数的输入应按试剂要求输入其给定值,一般试剂商在试剂盒说明书中给予说明。
  (4)反应温度。
  (5)测试空白要准确。
  (6)吸液量的大小直接影响交叉污染和测量的重复性,建议测试污染性大的物质试剂量应相应增加。一般应>400μl,一般项目为500μl即可。
  (7)测试不准确、重复性差从操作上看主要有:全自动尿液分析仪本身原因如比色杯中有气泡;光源灯老化;光源电压不稳;340nm滤光片性能变差,透射性变小;波长不准确等有关。一般检查液路接口是否松动漏气,更换光源灯泡和340nm滤光片即可解决。至于电路问题,加热元件损坏,温度不受控的问题只能由工程师解决。
  总之,酶的测定影响准确度的因素很多,只要认真操作,综合分析影响测定的各项因素,认真分析,酶测定的问题不难解决的。根据我们的经验只要试剂、样品准确,保存得当,样品预处理仔细,经常维护、保养尿液分析仪,认真操作,问题会自行解决。

 


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